请问，GAPDH作为RT-PCR内参的原理是什么呀？我知道为什用它做内参了，就是不清楚怎么用它，谢谢啦！

请问，GAPDH作为RT-PCR内参的原理是什么呀？我知道为什用它做内参了，就是不清楚怎么用它，谢谢啦！

因为GAP360问答DH的基因表达量在是不同状态下是变化很小的，所以可以认为GAPDH表还附序达是恒定的，所以可以选择它来做内参。

拓展资料：

GAPDH或G3PDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase）的英文缩写。GAPDH是糖酵解反应中的一个酶，广泛分布于各种组织中的细胞。

该酶是糖酵解反应中的一个酶，由4个30－40kDa的亚基组成，分子量146kDa。该酶基因为管家（鲜言守重校合洲青品机housekeeping）基因，几乎在所有组织中都高水平表达，在费但同种细胞或者组织中的蛋白质表达孙备量将后跳官图程肥量一般是恒定的，且不受含有的部分识别位点、佛波脂等的诱导物质的影响而保持恒定，故被广泛用作抽提totalRNA，poly(A)+RNA，Westernblot等实验操作的标准化的内参。常用的内参有，ACTB（β-actin、β-肌动蛋白）、GAPD响饭火H或18S等。目的是在于避免RNA定量误差、加样误差以及各PCR反应体系中扩增效率不均一、各孔间的温差等所造成的误差、这些都是管家基因，在各个组织中的表达量相对稳定，其中18S同整个基因谱有关（负责装配），它在总RNA中占的比例最高。

【GAPDH的作用】广泛用作Westernblot蛋白质标准化的内参，即将每个样品测得的目的蛋白物含量与本样品的GA波校盾尔但零本针PDH含量相除，得到每个样品目的蛋白的相对含量，然后才进行样品与样品之间的比较。

【GAPDH】或G3PDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate价清林希南弱历很dehydrogenase）的英文缩写。GAPDH是参与糖儿快酵解的一种关键酶，由4个30-40kDa的亚基组又滑练聚流晶可众备使游成，分子量146kDa，检测条带大约在36kDa。GAPDH基因几乎在所有组织中都高水平表达，且GAPDH作度鲜刻讨河为管家基因在同种细胞或者组织中的蛋白质表达量一般是恒定的。

【WesternBlot】蛋白质印迹法（免疫印迹试验）。入判异急粮找客他强它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。