经多聚甲醛固定的冰冻切片要做抗原修复吗？

经多聚甲醛固定的冰冻切片要做抗原修复吗？

冰冻切片一般不需要抗原修复，石蜡切片需要抗原修复。目前进行的常规石蜡切片标本，一般均用甲醛固定。事实上经甲醛固定的部分组织细胞，免疫组化标记敏感性明显降低，其原因为：(1)在用甲醛固定过程中形成醛键而封闭了部分抗原决定簇；(2)甲醛在保存过程中会形成羧甲基，而封闭抗原决定族；(3)在用固定剂固定时，会使蛋白与蛋白之间发生交联，也可能会封闭抗原决定族。因此在染色时为取得良好的染色效果，必须对有些抗原进行预先修复。对于冰冻切片用丙酮或甲醛固定效果较好。因为你是用4%PFA固定还是要考虑做抗原修复的。修复抗原的方法很多，一常用的抗原修复方法有微波修复法，高压加热法，酶消化法，水煮加热法等，常用的修复液是pH6.0的0.01mol/L的柠檬酸盐缓冲液。也有人用蒸馏水修复抗原，方法如下：将脱蜡水洗过的切片放入盛有蒸馏水的容器中，置微波炉内高中火5 min煮沸，中低火维持沸腾状态10 min。